Метод диагностики — миелограмма

Метод диагностики - миелограммаКостный мозг (КМ) — это важнейшая кроветворная (миелоидная) ткань человеческого организма. В ней размножаются и созревают стволовые клетки — клетки-предшественницы всех кровяных клеток: эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов. Они являются основным компонентом костного мозга. Костный мозг есть внутри всех костей человеческого организма. Кости имеют пористую структуру, густо пронизаную проницаемыми сосудами, в которые легко попадают молодые кровяные клетки.

Различают два типа КМ: красный и желтый. Масса КМ составляет около 4,6% от общего веса человека. При этом вес красного и желтого его типов в костях приблизительно одинаков. Красный костный мозг дислоцируется в костях таза, плоских костях, концах трубчатых костей и позвонках. Именно в нем происходят процессы кроветворения.

Желтый тип локализуется в полостях трубчатых костей и представляет собой жировую ткань, которая служит резервом для красного типа КМ. В условиях острой нехватки молодых клеток крови желтый мозг трансформируется в красный и в нем начинается гемопоэз.

Миелограммой называется результат прижизненного качественного и количественного исследования тканевого и клеточного состава костного мозга. Термин происходит от слов греческого происхождения и буквально переводится как «запись костного мозга». Расшифровка результатов исследования мазка или пунктата КМ оформляется в виде таблицы, в которой представлено процентное соотношение разных клеток.

В отличие от крови, порцию которой можно легко взять для проведения анализа из периферических сосудов, КМ недоступен для простого отбора образцов.

Чтобы выполнить его исследование, необходимо провести пункцию или биопсию кости.

Эта манипуляция для гематолога не является сложной, но требует специальных инструментов и соответствующей квалификации врача, поэтому ее не проводят в обычных клинических лабораториях.

Для проведения миелограммы необходим красный КМ. Получить его образец можно путем пункции грудины (стернальная пункция), биопсии подвздошной (трепанобиопсия), пяточной, бедренной или большеберцовой костей.

Метод диагностики - миелограммаПервые две процедуры для взятия образца биоматериала в гематологии используются чаще всего. Трепанобиопсия позволяет получить большой объем биоматериала для исследования. Взятие образцов КМ из пяточной и других костей ног применяют у новорожденных и маленьких детей.

Показания и противопоказания

Целью исследования КМ является выявление нарушений гемопоэза. Исследование миелограммы показано при:

  • анемиях (кроме железодефицитной) и цитопениях;
  • беспричинном увеличении СОЭ в общем анализе крови;
  • острых и хронических лейкозах;
  • эритремии;
  • миеломе;
  • лимфогранулематозе и неходжкинских лимфомах;
  • метастазировании злокачественных опухолей в кости;
  • наследственных заболеваниях (болезнях Ниммана-Пика, Гоше, Урбаха-Вите);
  • спленомегалии неясного происхождения.

Пункцию костного мозга проводят для установления стадии и фазы лейкозов, их дифференциальной диагностики с лейкемоидными реакциями. Исследование миелограммы показано для определения гистосовместимости костного мозга донора и реципиента.

Стернальная пункция или трепанобиопсия противопоказаны больным с острым инфарктом миокарда, инсультом, в момент приступа стенокардии, удушья, при гипертоническом кризе.

Подготовка к процедуре

Процедура взятия КМ является обычной для гематологии. Какой-либо специальной подготовки пациента к стернальной пункции или трепанобиопсии не требуется.

Метод диагностики - миелограммаПодготовка к манипуляции мало отличается от подготовки к другим малоинвазивным процедурам:

  • больной перед манипуляцией должен быть обследован (общий анализ крови, коагулограмма);
  • за несколько дней отменяют антикоагулянты и антиагреганты, а также все другие лекарства, кроме жизненно необходимых;
  • за несколько часов пациенту нельзя кушать и пить (если процедура назначена на вторую половину дня, пациенту с утра необходим легкий завтрак);
  • за 2 часа до манипуляции нужно опорожнить кишечник, а непосредственно перед ней — мочевой пузырь;
  • если в месте будущего прокола кожи имеются волосы, их сбривают.

О наличии у обследуемого какой-либо аллергии необходимо уведомить врача, особенно если это аллергическая реакция на местные анестетики.

В день забора биоматериала больному нельзя назначать другие процедуры и оперативные вмешательства. При сильном чувстве страха больному следует принять седативные препараты за полчаса до процедуры, о чем нужно сообщить врачу. Стернальная пункция и трепанобиопсия не являются приятными манипуляциями, но и к болезненным их отнести сложно.

Место прокола кожи и надкостницы обрабатывается местным анестетиком, поэтому боль в этом месте не ощущается.

Непосредственно перед процедурой у пациента берут информированное согласие на манипуляцию: ему объясняют ход ее проведения, а также возможные осложнения после нее. Если пункция предстоит несовершеннолетним детям, информированное согласие берут у их родителей или других законных представителей.

Проведение костномозговой пункции

Больного укладывают на кушетку: при стернальной пункции — на спину (между лопатками укладывают валик), при трепанобиопсии — на правый бок или живот. Место пункции обрабатывают спиртовым раствором йода и проводят обезболивание с помощью местноанестезирующих препаратов.

Для проведения манипуляции нужен специальный инструментарий: игла Кассирского (для стернальной пункции) или игла-троакар с мандреном (для трепанобиопсии). На свободном конце троакара имеются насечки, играющие роль своеобразной «фрезы». С помощью этой «фрезы» вкручивающими движениями «просверливают» наружный слой кости.

Метод диагностики - миелограммаИгла при стернальной пункции вводится между третьим и четвертым ребрами по срединной линии. Прокол кожи и подвздошной кости при проведении трепанобиопсии делают в районе локализации гребня кости, чаще слева от позвоночника: так врачу легче проводить манипуляцию.

У маленьких детей грудина слишком тонкая и мягкая, поэтому имеется вероятность ее сквозного прокола, что является неблагоприятным осложнением.

По этой причине взятие образца костного мозга у детей проводят из бедренной или большеберцовой кости, а у новорожденных — из пяточной.

Другие кости вместо грудины выбирают также для взятия биоптата у пожилых людей с выраженным остеопорозом и у лиц, длительно принимающих кортикостероиды (из-за риска перелома грудины).

Взятый пунктат (биоптат) извлекают из иглы и помещают на предметное стекло (для цитологического исследования) или во флакон с формалином (для гистологического обследования). Чтобы не произошло свертывания жидкой части костного мозга на предметном стекле, в пунктат добавляют фиксаторы.

Размеры взятого биоптата должны позволять получить срезы для исследования площадью не менее 2×20 мм или 3×15. Очень важно при проведении пункции (биопсии) взять костный мозг из костномозговой полости.

Если в препарате большая часть будет занята надкостницей или субкортикальными костномозговыми ячейками, полноценное гистологическое исследование проведено не будет: для заключения необходим просмотр 5 и более костномозговых ячеек.

После взятия биоматериала иглу извлекают из кости, место прокола обрабатывают антисептиком, накладывают стерильную салфетку и заклеивают пластырем.

Возможные осложнения

Взятие пунктата (биоптата) костного мозга считается безопасной процедурой. Если она выполняется опытным врачом и с соблюдением всех правил, осложнения после нее возникают очень редко. К таким редким последствиям относятся:

  • инфицирование места прокола;
  • кровотечения;
  • сквозной прокол или перелом грудины;
  • обморочные и шоковые состояния у истероидных пациентов.

Чтобы избежать возможных последствий, врачу необходимо строго соблюдать все этапы процедуры, а перед ней — провести доверительную беседу с пациентом.

Восстановление после манипуляции

Метод диагностики - миелограммаСама процедура длится не более 15 минут. После взятия образцов, больной в течение часа находится под медицинским наблюдением: контролируют пульс, артериальное давление, температуру. Если никаких осложнений в течение часа не обнаружилось, пациента отпускают домой. При болевых ощущениях больные могут принимать обезболивающие препараты.

Поскольку после процедуры возможны головокружения и обмороки, обследованным пациентам запрещено в этот день вести автомобиль. Риск возникновения кровотечения из места прокола кожи является причиной запрета выполнять тяжелые работы, заниматься спортом или употреблять алкогольные напитки в течение нескольких дней после процедуры.

Чтобы недопустить инфицирования места прокола кожи, необходимо своевременно менять салфетки и обрабатывать ранку антисептиками. До заживления раны запрещается посещать общественные бассейны, сауны, купаться в реке.

Цитологическое и гистологическое исследование

Мазки костного мозга готовят сразу после взятия пункции. Биоптат для гистологического исследования консервируют в специальных растворах. В лаборатории из биоптата готовят гистологические срезы, окрашивают их и оценивают.

При этом стараются приготовить как можно больше микропрепаратов КМ, особенно при гипопластических процессах, когда взятые образцы очень бедны клеточными элементами.

Цитологическое исследование проводится в день отбора образцов, на гистологию требуется до 10 дней.

При цитологическом исследовании миелограммы оценивают:

  • количество и соотношение разных видов клеток;
  • патологические изменения формы, размеров и структуры клеточных элементов;
  • тип кроветворения;
  • цитоз;
  • костномозговые индексы;
  • наличие специфических клеток.

Результат цитологического исследования имеет вид таблицы из трех колонок: в первой указаны названия клеточных элементов, во второй — показатели, определенные в образцах КМ, в третьей — референсные (нормальные) количественные или процентные показатели.

Читайте также:  Что такое микропротезирование зубов – виды микропротезирования в стоматологии, показания, цены

Нормальная миелограмма

Метод диагностики - миелограммаВ образце костного мозга здорового человека присутствует не более 2% клеток стромы: фибро- и остеобластов, адипоцитов, эндотелиальных клеток. Среди клеточных элементов паренхимы обнаруживаются недифференцируемые стволовые, бластные (молодые) и зрелые клетки. Количество бластов не превышает 1,7%.

В КМ обнаруживаются пять клеточных ростков:

  1. Эритроидный (представлен эритробластами, пронормоцитами, нормоцитами, ретикулоцитами и эритроцитами).
  2. Тромбоцитарный (к нему относятся мегакариобласты, промегакариоциты, мегакариоциты и тромбициты).
  3. Гранулоцитарный (представлен миелобластами, промиелоцитами, миелоцитами, метамиелоцитами, палочкоядерными и сегментоядерными нейтрофилами, базофилами и эозинофилами).
  4. Лимфоидный (к нему относятся лимфобласты, пролимфоциты и лимфоциты).
  5. Моноцитарный (состоит из монобластов, пронормоцитов и моноцитов).

Клетки разных ростков имеет свои особенности строения и свойства, например, чувствительность к кислотам, щелочам или другим химическим соединениям. Эти отличительные особенности используют при исследовании образцов КМ, применяя различные красители для обработки мазков и срезов.

Кроме цитологического состава КМ важен также темп их созревания. Он определяется путем определения соотношений (индексов) между созревающими и зрелыми клетками:

  • индекс созревания нейтрофилов (норма — 0,6-0,8);
  • индекс созревания эритробластов (норма — 0,8-0,9);
  • соотношение клеток белого и красного ростка (норма — 3-4:1).

При исследовании трепанобиоптата определяют также соотношение между паренхимой КМ, жировой и костной тканью в срезах. Нормальным считается их соотношение 1:0,75:0,45. Нарушение этих соотношений свидетельствует о патологии костного мозга. Гистологическое исследование диагностически более значимо, чем цитологическое, при гипоплазиях КМ, лейкозах и раковых метастазах в кости.

Патологическая миелограмма

Увеличение, уменьшение пула отдельных ростков клеток костного мозга и нарушение их соотношений указывает на патологию. Увеличение количества мегакариоцитов в КМ говорит о наличии ракового метастазирования в кости.

Повышение количества бластных клеток на 20% и более наблюдается при остром лейкозе. Увеличение соотношения белого ростка к красному может свидетельствовать о хроническом миелолейкозе, сублейкемическом миелозе или лейкемоидных реакциях.

При бластном кризе или хроническом миелолейкозе возрастает индекс созревания нейтрофилов.

Повышение количества эозинофилов указывает на аллергические реакции, глистные инвазии, онкологические заболевания, острый лейкоз, лимфогранулематоз. Базофилы растут при эритремии, базофильном лейкозе, хроническом миелолейкозе. Увеличение концентрации лимфоцитов характерно для апластической анемии или хронического лимфолейкоза.

Эритробласты увеличиваются при анемиях и остром эритромиелозе, моноциты — при сепсисе, туберкулезе, лейкозе, хроническом миелолейкозе, плазматические клетки — при миеломной болезни, агранулоцитозе, апластической анемии.

Понижение количества мегакариоцитов свидетельствует о гипо- и апластических аутоиммунных процессах, угнетении КМ после лучевой терапии и приема цитостатиков.

Соотношение белого и красного ростков падает после обильных кровотечений, гемолиза, при остром эритромиелозе и эритремии. Снижение индекса созревания эритробластов характерно для В12-дефицитной анемии.

Количество эритробластов снижается при апластической анемии, красноклеточной аплазии КМ, после лучевой и химиотерапии.

Стоимость проведения процедуры взятия образцов костного мозга путем стернальной пункции или трепанобиопсии с последующей миелограммой колеблется от 1 до 3 тысяч рублей. Цена зависит от формы собственности специализированной лаборатории, метода отбора образцов и объема исследований КМ (цитология, гистология).

Миелограмма в норме — цитология исследования костного мозга

На основании общеклинического анализа крови сложно дать оценку состояния гемопоэза. Более полное представление дает изучение костного мозга (цитологическое, цитохимическое и др.).

Цитологический анализ костного мозга играет большую роль в диагностике заболеваний кроветворной системы.

Подсчет миелограммы дает представление о характере эритропоэза (нормобластический или мегалобластический), позволяет обнаружить клетки, характерные для различных заболеваний системы крови (множественной миеломы, острых лейкозов, хронического миелолейкоза, хронического лимфолейкоза, лейкемизированных неходжкинских лимфом, болезни Гоше, Ниманна-Пика, метастазов рака в костном мозге и др.).

Данные миелограммы необходимы для проведения дифференциального диагноза с лейкемоидными реакциями. Сопоставление данных костномозгового кроветворения с картиной периферической крови и клинической симптоматикой позволяет уточнить причину анемии.

Имеются абсолютные и относительные показания к стернальной пункции.

Абсолютные показания: все анемии (кроме типичной железодефицитной), различные цитопении (одноростковая, двуростковая, панцитопения), острые лейкозы, хронические лейкозы в начальной стадии (для подтверждения диагноза и исключения лейкемоидных реакций), выраженное изолированное увеличение СОЭ (для исключения множественной миеломы и макроглобулинемии Вальденстрема), подозрение на метастазы злокачественной опухоли в костном мозге. Относительные показания: железодефицитные анемии, хронические лейкозы в развернутой стадии.

Аспирационная биопсия костного мозга является технически простым, безопасным и легкодоступным методом. Наиболее часто используется стернальная пункция, предложенная в 1927 г. М. И. Аринкиным и впервые выполненная на кафедре факультетской терапии Военно-медицинской академии.

При необходимости можно пунктировать гребень или бугристость подвздошной кости, у детей — пяточную кость. Пункция грудины выполняется иглой И. А. Кассирского с предохранительным щитком.

После взятия аспирата костного мозга производят подсчет количества миелокариоцитов, мегакариоцитов, ретикулоцитов, готовят мазки для подсчета миелограммы.

Нормальная миелограмма

Показатели миелограммы Среднее значение (%) Пределы колебаний (%)
Ретикулярные клетки 0,9 0,1-1,6
Недифференцированные бласты 0,6 0,1-1,1
Миелобласты 1,0 0,2-1,7
Промиелоциты 2,5 1,0-4,1
Миелоциты нейтрофильные 9,6 7,0-12,2
Метамиелоциты нейтрофильные 11,5 8,0-15,0
Палочкоядерные нейтрофилы 18,2 12,8-23,7
Сегментоядерные нейтрофилы 18,6 13,1-24,1
Всего клеток нейтрофильного ряда 60,8 52,7-68,9
Миелоциты эозинофильные 0,1 0,0-0,2
Метамиелоциты эозинофильные 0,2 0,1-0,4
Эозинофилы 2,8 0,4-5,2
Всего клеток эозинофилъного ряда 3,2 0,5-5,8
Миелоциты базофильные 0,1 0-0,3
Базофилы 0,1 0-0,3
Всего клеток базофильного ряда 0,2 0-0,5
Лимфобласты 0,1 0-0,2
Пролимфоциты 0,1 0-0,2
Лимфоциты 8,8 4,3-13,3
Всего клеток лимфоидного ряда 9,0 4,3-13,7
Монобласты 0,1 0-0,2
Моноциты 1,9 0,7-3,1
Плазмобласты 0,1 0-0,2
Проплазмоциты 0,1 0,1-0,2
Плазматические клетки 0,9 0,1-1,8
Эритробласты 0,6 0,2-1,1
Нормобласты базофильные 3,6 1,4-5,8
Нормобласты полихроматофильные 12,9 8,9-16,9
Нормобласты оксифильные 3,2 0,8-5,6
Всего клеток эритроидного ряда 20,5 14,5-26,5
Мегакариоциты 0,4 0,2-0,6

Миелокариоциты миелограммы. У здоровых людей количество миелокариоцитов (всех ядросодержащих клеток костного мозга) в камере Горяева составляет 50-250•109/л.

Мегакариоциты миелограммы. Нормальное количество мегакариоцитов в камере Фукса-Розенталя составляет 0,05-0,1•106/л. Необходимо также определять количество мегакариоцитов в окрашенных мазках в 250 полях зрения под малым увеличением и при подсчете миелограммы в процентах.

Следует помнить, что снижение уровня миелокариоцитов и мегакариоцитов в миелограмме отмечается также при разведении аспирата периферической кровью (технические погрешности при выполнении стернальной пункции).

Ретикулоциты миелограммы. Нормальное количество ретикулоцитов в костном мозге составляет 20-30%о. Увеличение их числа наблюдается при гемолитических и постгеморрагических анемиях.

Морфологический анализ клеток костного мозга (подсчет миелограммы) производят на 500 клеток костного мозга, после чего вычисляют процентное содержание каждого вида клеток.

При анализе миелограммы необходимо оценить клеточность костного мозга (нормо-, гипо- или гиперклеточный), дать качественную характеристику всех клеточных рядов с определением индексов созревания, лейкоэритробластического соотношения, характера эритропоэза (нормобластический, мегалобластический или с мегалобластоидными чертами) и количества митозов. Отдельно следует оценить мегакариоцитопоэз (количество и функция мегакариоцитов).

Костномозговой индекс созревания нейтрофилов определяется по формуле: (промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты)/ (палочкоядерные + сегментоядерные нейтрофилы) В норме костномозговой индекс созревания нейтрофилов равен 0,6-0,8.

Метод диагностики - миелограмма

  • Индекс созревания эритроидных клеток определяется по формуле: (полихроматофильные + оксифильные нормоциты)/(эритробласты + базофильные + полихроматофильные + оксифильные нормоциты) В норме индекс созревания эритроидных клеток равен 0,8-0,9.
  • Уменьшение индекса свидетельствует о задержке гемоглобинизации и/или преобладании молодых базофильных нормоцитов, дает возможность ориентировочно оценить запасы и обмен железа в организме.
  • Лейкоэритробластическое соотношение определяется по формуле: (гранулоциты): (ядросодержащие клетки эритроидного ряда) и в норме составляет 3-4:1.
  • Количество митозов в норме составляет 3,5 на 1000 для клеток гранулоцитарного ряда и 5 на 1000 — для клеток эритроидного ряда.
  • Заключение по миелограмме не должно быть категоричным, поскольку для постановки диагноза необходимо учитывать клинические данные и показатели периферической крови.
  • Для более полной характеристики гемопоэза, особенно мегакариоцитопоэза, в ряде случаев требуется гистологическое исследование костного мозга методом трепанобиопсии.

Определение сидеробластов и сидероцитов в миелограмме

При железодефицитных и сидеробластных анемиях важно определять количество сидероцитов и сидеробластов — эритроцитов и эритробластов, содержащих в цитоплазме железо в виде гемосидерина и ферритина (зернышки синего цвета при окраске по Перлсу диаметром 0,2-1,5 мкм). У здоровых людей в периферической крови содержится 1,1-3,0% (в среднем 1,6%) сидероцитов. Содержание сидеробластов в костном мозге составляет 15-40% от всех клеток эритроидного ряда; количество гранул в них обычно 1-2 (не более 4).

Клиническое значение. При хронических железодефицитных анемиях отмечается снижение количества сидероцитов и сидеробластов в костном мозге, гранулы железа в них практически выявить не удается.

Читайте также:  Фонофорез при радикулите

Увеличение количества сидеробластов с большим количеством гранул железа в каждом из них, появление кольцевых форм сидеробластов наблюдается при наследственных и приобретенных сидеробластных анемиях (интоксикация свинцом, один из вариантов миелодиспластического синдрома — рефрактерная анемия с кольцевыми сидеробластами).

Наряду с исследованием крови и костного мозга для диагностики специфических поражений и осложнений проводимой терапии в ряде случаев необходим анализ биологических жидкостей (мочи, кала, мокроты, экссудатов, ликвора).

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

— Также рекомендуем «Гистологические исследования в гематологии. Показания к трепанобиопсии»

Оглавление темы «Методы исследования в гематологии»:

Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга. Подсчет миелограммы. в Москве

  • Приём, исследование биоматериала
  • Показания к назначению
  • Описание

Приём материала

  • Можно сдать в отделении Гемотест

Гемобластозы:

  1. острые лейкозы;
  2. хронические лейкозы;
  3. миелодиспластический синдром;
  4. миеломная болезнь;
  5. миелофиброз;
  6. анемии различного генеза;
  7. лейкемоидные реакции;
  8. лимфогранулематозы;
  9. наследственные заболевания системы крови.

Подробное описание исследования

Красный костный мозг (миелоидная ткань) – основной орган кроветворения, расположен в губчатом веществе плоских костей (кости черепа, грудина, лопатки, позвонки, кости таза) и в эпифизах трубчатых костей. В нем находится множество стволовых кроветворных клеток, клетки-предшественники миело- и лимфопоэза, а также клетки крови на различных стадиях дифференцировки.

Миелопоэз — образование форменных элементов крови (эритроцитов, гранулоцитов, моноцитов и тромбоцитов) в красном костном мозге. Предшественники лимфоцитов мигрируют из миелоидной в лимфоидную ткань (тимус, селезенка, лимфатические узлы и др.), где происходит лимфопоэз – образование Т- и В-лимфоцитов, плазмоцитов, др. иммуноцитов.

Основой диагностики заболеваний системы крови является морфологическое исследование пунктатов костного мозга, лимфатических узлов и мазков периферической крови. Данные цитологического исследования костного мозга чрезвычайно важны для выявления нарушений кроветворения.

Существуют два метода получения образцов костного мозга: аспирационная биопсия

и трепанобиопсия. При пункционном (аспирационном) анализе исследованию подвергается нативная клеточная взвесь (собственно костный мозг), при трепанобиопсии исследуется остеомедуллярный цилиндр (клеточная взвесь + микроокружение + кость). Метод трепанобиопсии костного мозга позволяет получить более полную информацию о состоянии костномозгового кроветворения.

Цитологическое исследование отпечатков трепанобиоптата костного мозга проводят с целью идентификации диагноза, для качественной и количественной оценки функции костномозгового кроветворения у пациентов с опухолевыми заболеваниями системы крови, анемиями и другими заболеваниями, а также с целью оценки проводимой терапии.

Трепанобиопсия костного мозга выполняется амбулаторно, под местной анестезией. Взятие биоматериала производится иглой Jamshidi в области задневерхней ости правой или левой подвздошной кости. После получения образца ткани на кожу накладывают асептическую повязку, пациент находится под наблюдением врачей 2-3 часа, после чего отправляется домой.

Отпечатки трепанобиоптата получают методом «прокатывания» столбика между двумя предметными стеклами. Препарат высушивается, маркируется и отправляется в лабораторию. В лаборатории отпечатки окрашиваются специальным красителем и анализируются под световым микроскопом.

В норме, состав костного мозга может подвергаться значительным изменениям в зависимости от возраста пациента, функционального состояния костного мозга, а также качества проводимой манипуляции.

Миелограмма – качественное и количественное исследование  клеточного состава костного мозга. При подсчете миелограммы определяются клеточность состава, внешний вид клеток (моно/полиморфизм), количество мегакариоцитов, наличие скоплений опухолевых клеток.

  • При интерпретации миелограммы определяют процентное соотношение всех клеточных элементов отпечатка и морфологическое описание клеток в составе каждого из клеточных рядов.
  • Миелограмма представляет собой таблицу, в которой все клеточные элементы распределены в соответствии со своими клеточными линиями в зависимости от стадии их созревания
  • Цитологический анализ отпечатков трепанобиоптата и интерпретация миелограммы являются наиболее значимыми методами определения заболеваний системы кроветворения.

Использованная литература

Интерпретацию миелограммы проводит врач-гематолог. Отклонение показателей от нормальных значений могут свидетельствовать о патологическом функционировании костного мозга.

Миелограмма

Подсчет абсолютного количества миелокариоцитов и мегакариоцитов с разведением костного мозга проводится не во всех лабораториях, поэтому часто исследование костного мозга ограничивается только исследованием мазков с подсчетом миелограммы. Миелограмма — процентное содержание различных миелокариоцитов.

Фиксированные и окрашенные препараты костного мозга исследуют сначала под малым увеличением. При этом оценивают:

  • клеточность костного мозга — соответствует норме или отличается от таковой (гиперклеточный, богатый, гипоклеточный, скудный костный мозг). В лабораториях, где не проводится подсчет миелокариоцитов в камере Горяева, иногда возникают трудности в оценке клеточности костного мозга. При этом удобно иметь под рукой окрашенные мазки периферической крови с уровнем лейкоцитов, соответствующим верхней и нижней границам нормы ядерных элементов костного мозга — для сравнения. Это может помочь дать ориентировочное заключение о клеточности костного мозга (например, около верхней или нижней границы нормы);
  • мономорфность или полиморфность костного мозга;
  • количество мегакариоцитов, если подсчет их в данной лаборатории проводится в мазке (см. подсчет мегакариоцитов);
  • наличие гнезд раковых клеток (метастазы) или выявление гигантских клеток (Гоше, Нимана-Пика и др.);
  • участки препарата, подходящие для подсчета миелограммы на большом увеличении (тонкая зона мазка с расположением эритроцитов отдельно друг от друга и достаточным количеством исследуемых клеток).

Затем препараты исследует с иммерсионным объективом.

При этом проводят дифференцированный подсчет миелокариоцитов (морфологические характеристики ретикулярных клеток и морфологические характеристики клеток миелоцитарного ростка описаны в соответствующих статьях).

Считают подряд все попадающиеся клетки в разных участках мазка (если мазков несколько — считают клетки в разных мазках) общим количеством не менее 500, а затем выводят процентное соотношение клеток.

В результат подсчета миелограммы должны входить следующие виды клеток:

Отдельно на бумаге подсчитывают количество митозов. Выражают их на 100 клеток в каждом ряду.

Клеточный состав костного мозга подвержен значительным количественным и качественным колебаниям, поэтому для объективной оценки пунктата костного мозга помимо подсчета миелограммы необходимо определение соответствующих костно-мозговых индексов.

Лейко-эритробластическое отношение (Л/Э) вычисляется как отношение суммы процентного содержания всех лейкоцитов (сюда относят и гранулоциты, и агранулоциты — моноциты, лимфоциты, плазматические клетки) к общему содержанию всех ядерных элементов эритроидного ряда — от пронормобласта до зрелых форм. У здоровых взрослых людей лейко-эритробластическое отношение равно 2,1 — 4,5.

Повышение лейко-эритробластического отношения при богатом костном мозге свидетельствует о гиперплазии клеток лейкопоэза (что характерно для лейкозов (ХМЛ, ХЛЛ), инфекций, интоксикаций и др. состояний), а при бедном костном мозге — о подавлении красного ростка (гипопластическая анемия).

Снижение лейко-эритробластического отношения при богатом костном мозге наблюдается при гемолитической анемии, начале железодефицитной анемии, постгеморрагической и мегалобластной анемиях, при бедном костном мозге — при агранулоцитозе.

Следует отметить, что при гипоплазии и аплазии костного мозга, когда снижено количество клеток и лейкопоэза, и эритропоэза, лейко-эритробластическое отношение может быть в пределах нормы.

  • Индекс созревания нейтрофилов (ИСН) выражает отношение молодых нейтрофильных гранулоцитов к зрелым и вычисляется по формуле:
  • (промиелоциты + миелоциты + метамиелоциты) / (палочкоядерные нейтрофилы + сегментоядерные нейтрофилы).
  • В норме этот индекс равен 0,5 — 0,9.
  • Снижение индекса созревания нейтрофилов может быть обусловлено значительной примесью периферической крови.
  • Повышение индекса созревания нейтрофилов при богатом костном мозге может наблюдаться при ХМЛ, лекарственной интоксикации, при бедном костном мозге — встречается редко (при быстрой элиминации зрелых форм).
  1. Индекс созревания эритрокариоцитов (ИСЭ) — отношение количества гемоглобинсодержащих нормобластов (а в патологических случаях — мегалобластов) к количеству всех клеток эритроидного ростка:
  2. (полихроматофильные + оксифильные нормобласты) / (эритробласты + пронормобласты + все нормобласты).
  3. В норме ИСЭ равен 0,7 — 0,9.

Снижение индекса созревания эритрокариоцитов наблюдается при железодефицитной и свинцовой анемиях, талассемии, гемоглобинопатиях и др. состояниях (когда идет нарушение синтеза гемоглобина).

Результаты исследования костного мозга оформляются в виде бланка.

В зависимости от требований, предъявляемых лаборатории клиницистами, от «местных» лабораторных условий форма бланка и последовательность его заполнения может значительно варьировать в разных лабораториях, но обычно бланк состоит из двух частей: цифровой и описательной. Результаты подсчета миелограммы составляют цифровую часть бланка. Здесь помимо результатов исследования должны быть приведены нормальные величины всех показателей.

Клеточный состав костного мозга в норме (по В. В. Соколову, и И. А. Грибовой, 1972)

Клеточные элементы Содержание, % Средние значения Пределы колебаний Ретикулярные клетки

Бласты

Миелобласты

Нейтрофильные промиелоциты

миелоциты

метамиелоциты

палочкоядерные

сегментоядерные

Все нейтрофильные элементы

Эозинофилы всех генераций

Базофилы всех генераций

Эритробласты

Пронормобласты

Нормобласты: базофильные

полихроматофильные

оксифильные

Все эритроидные элементы

Моноциты

Лимфоциты

Плазматические клетки

Количество миелокариоцитов (в тыс. в 1 мкл)

Лейко-эритробластическое отношение

Индекс созревания нейтрофилов

Индекс созревания эритрокариоцитов

0,9 0,1 — 1,6
0,6 0,1 — 1,1
1,0 0,2 — 1,7
2,5 1,0 — 4,1
9,6 6,9 — 12,2
11,5 8,0 — 14,9
18,2 12,8 — 23,7
18,6 13,1 — 24,1
60,8 52,7 — 68,9
3,2 0,5 — 5,8
0,2 0,0 — 0,5
0,6 0,2 — 1,1
0,6 0,1 — 1,2
3,0 1,4 — 4,6
12,9 8,9 — 16,9
3,2 0,8 — 5,6
20,5 14,5 — 26,5
1,9 0,7 — 3,1
9,0 4,3 — 13,7
0,9 0,1 — 1,8
118,4 41,6 — 195,2
3,3 2,1 — 4,5
0,7 0,5 — 0,9
0,8 0,7 — 0,9
Читайте также:  Особенности развития и лечения гемипареза

Под цифровой частью бланка следует описательная часть с выводами. Прежде чем сделать окончательное заключение о состоянии костного мозга, необходимо соотнести полученные данные с нормой и с результатами исследования периферической крови.

В ряде случаев необходимо решить, не разведен ли костный мозг кровью, так как по препарату, сильно разведенному периферической кровью, невозможно достоверно оценить костно-мозговое кроветворение. В таких случаях рекомендуется повторная пункция.

  • пунктат бедный;
  • пунктат представлен преимущественно зрелыми клетками периферической крови, соотношение нейтрофилов и лимфоцитов приближается к периферической крови;
  • в пунктате присутствуют единичные эритрокариоциты, а периферическая кровь анемию не показывает;
  • лейко-эритробластическое отношение повышено, индекс созревания нейтрофилов снижен;
  • единичные мегакариоциты в препарате или полное их отсутствие, а количество тромбоцитов в периферической крови в норме.
  • клеточность костно-мозгового пунктата
  • клеточный состав — мономорфный или полиморфный; если мономорфный, то какими клетками представлен в основном (бластными, лимфоидными, плазматическими и пр.) или отмечается тотальная метаплазия;
  • тип кроветворения (нормобластический, мегалобластический, смешанный), если имеются мегалобластические элементы, указать в процентах;
  • значение лейко-эритробластического индекса, в случае отклонения от нормы — пояснить, за счет каких элементов.
  • размеры ростка (а пределах нормы, ряд хорошо выражен, сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
  • особенности созревания ( с нормальным созреванием, с задержкой созревания на молодых формах, с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием зрелых форм нейтрофилов);
  • наличие дегенеративных изменений (токсическая зернистость нейтрофилов, вакуолизация, гиперсегментация, цитолиз, кариорексис и др.)
  • наличие конституциональных аномалий гранулоцитов;
  • количество митозов на 100 клеток;
  • размеры ростка (в пределах нормы, ряд хорошо выражен, сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
  • особенности созревания (с нормальным созреванием, с незначительной задержкой созревания, с умеренной задержкой созревания, с резкой задержкой созревания, с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием оксифильных нормобластов);
  • наличие патологических форм эритрокариоцитов (мегалобластов)
  • наличие патологических форм эритроцитов (анизоцитоз, анизохромия, пойкилоцитоз, патологические включения в эритроцитах);
  • количество митозов на 100 клеток;
  • размеры ростка (в пределах нормы (5 — 12 мегакариоцитов в 250 полях зрения), сужен, редуцирован, представлен единичными клетками, гиперплазирован, раздражен и т. д.);
  • особенности созревания (с нормальным созреванием, с задержкой созревания (увеличение или преобладание базофильных форм), с асинхронным созреванием ядра и цитоплазмы, с преобладанием оксифильных форм);
  • наличие дегенеративных изменений;
  • наличие или отсутствие зернистости в цитоплазме;
  • степень отшнуровки тромбоцитов (умеренная, отсутствует, сниженная, повышенная, чрезмерная);
  • количество и характер свободно лежащих тромбоцитов (отсутствуют, единичные, небольшое количество, умеренное количество, значительное количество, расположены отдельными пластинками, группами или скоплениями);
  • особенности морфологии тромбоцитов (увеличение количества юных, старых или дегенеративных форм, форм раздражения, наличие гигантских, агранулярных тромбоцитов, анизоцитоз тромбоцитов).

Если количество бластов в пунктате превышает норму, необходимо описать их — форма и размер клеток, характер цитоплазмы (количество, цвет, наличие зернистости или палочек Ауэра, вакуолей), ядро (размеры, форма, окраска, структура хроматина), ядрышки (наличие, количество, размер, форма, окраска). При проведении цитохимических исследований бластов, в бланке приводятся их результаты.

  • расположение (равномерно по препарату, группами или отдельными скоплениями),
  • размеры клеток (преимущественно крупные, средние или мелкие, полиморфные);
  • контуры цитоплазмы (фестончатые, ровные);
  • окраску цитоплазмы (слабая, умеренная, резко базофильная);
  • наличие включений или зернистости в цитоплазме (скудная, умеренная, обильная);
  • расположение ядра (центральное, эксцентричное);
  • структуру хроматина (мелкогранулированная или крупногранулированная, глыбчатая и т. п.);
  • наличие многоядерных и пламенеющих клеток.
  • клетки Березовского-Штернберга;
  • клетки Ланганса;
  • клетки Гоше;
  • клетки Нимана-Пика;
  • клетки Ходжкина;
  • клетки неидентифицируемого вида (клетки метастазов злокачественных опухолей).
  • размер и форма клеток, тип генерации — микро-, мезо-, макрогенерации, смешанные типы и др.;
  • ядерно-цитоплазматическое соотношение (высокое, среднее, низкое или сдвиг его в пользу ядра или цитоплазмы);
  • цитоплазма — объем (обильная, умеренная, скудная, почти не определяется — «голоядерная клетка»), четкость границ (четкие, нечеткие, имеются разрывы, прослеживается не на всем протяжении), контуры (ровные, фестончатые и т. п.), цвет (голубой, серо-голубой, розовый, розово-фиолетовый, базофильный), как окрашена (равномерно, неравномерно, стекловидная, наличие перинуклеарного просветления), наличие зернистости (обильная, скудная, покрывающая ядро, крупная, пылевидная, однокалиберная и т. п.), включений, вакуолей;
  • ядро — количество (одно- или многоядерные клетки), расположение (в центре, эксцентрично, занимает почти всю клетку), размер (мелкие, средние, крупные, гигантские), форма (округлая, овальная, полигональная, вытянутая, бобовидная, булавовидная, расщепленная, в виде перекрученного жгута и др.), окрашиваемость (гипохромия, гиперхромия, анизохромия, равномерно окрашенное), наличие фигур деления;
  • структура хроматина — тонкодисперсная, гомогенная, нежнопетлистая, мелко- или крупнозернистая, глыбчатая, конденсация хроматина по краю ядерной мембраны и т. д.;
  • ядрышки — наличие (есть, нет), количество, форма (округлая, неправильная), размеры, цвет, четкость границ, выраженность перинуклеарного валика.

В конце описательной части, если позволяют данные, ставится предполагаемый лабораторный диагноз. Мазки костного мозга маркируют и хранят в архиве.

  • Л. В. Козловская, А. Ю. Николаев. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. Москва, Медицина, 1985 г
  • Руководство по клинической лабораторной диагностике. (Части 1 — 2) Под ред. проф. М. А. Базарновой, академика АМН СССР А. И. Воробьева. Киев, «Вища школа», 1991 г.
  • Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. Е. А. Кост. Москва «Медицина» 1975 г.
  • Руководство к практическим занятиям по клинической лабораторной диагностике. Под ред. проф. М. А. Базарновой, проф. В. Т. Морозовой. Киев, «Вища школа», 1988 г.
  • Н. Б. Протопопова, Д. А. Грищенко, О. Ю. Изъюрова, Е. М. Федина — Алгоритм исследования препаратов костного мозга — журнал «Справочник заведующего КДЛ» №1, январь, 2006 г.

Морфологическое исследование клеток костного мозга проводится в окрашенном препарате. Приготовление, фиксация и окраска мазков костного мозга осуществляются также, как и мазков периферической крови.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Мегакариобласты — родоначальные клетки мегакариоцитарного ряда. Размер — около 20 мкм. Ядро круглое, с мелкосетчатой структурой хроматина, иногда сплетенного в виде клубка.

Структура ядра грубее, чем у недифференцированного бласта, нередко видны ядрышки. Цитоплазма базофильная, беззернистая, имеет вид узкого ободка.

Часто контуры клеток неровные, с отростками цитоплазмы и образованием «голубых» пластинок.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Ретикулярные клетки довольно большого размера (18-30 мкм). Ядро круглое или овальное, структура ядра ажурная, иногда неравномерно-нитчатая и напоминает ядро моноцита, может содержать 1-2 ядрышка.

Цитоплазма обильная, чаще всего с нерезко очерченными границами, нередко отростчатая, окрашивается в светло-голубой или серовато-голубой цвет, иногда содержит пылевидную азурофильную зернистость.

В норме эти клетки в пунктате костного мозга содержатся в небольшом количестве.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Для подсчета миелокариоцитов пунктат костного мозга разводят в 200 раз. Для этого к 4 мл 3 -5% раствора уксусной кислоты добавляют 0,02 мл пунктата. Содержимое пробирки тщательно перемешивают и заполняют камеру Горяева. После оседания форменных элементов (через 1 — 2 мин) подсчитывают миелокариоциты в 100 больших квадратах (аналогично подсчету числа лейкоцитов в периферической крови).

Раздел: Гемоцитология

Читать

Монобласт — родоначальная клетка моноцитарного ряда. Размер 12 — 20 мкм. Ядро большое, чаще круглое, нежносетчатое, светло-фиолетового цвета, содержит 2 — 3 ядрышка. Цитоплазма монобласта сравнительно небольшая, без зернистости, окрашена в голубоватые тона.

Раздел: Гемоцитология

Читать

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector